細(xì)胞因子IFN γ可保護細(xì)胞免受病毒感染,屬于干擾素家族。大量研究表明,IFN γ由抗原觸發(fā)的細(xì)胞類型分泌,包括T細(xì)胞、幼稚CD4+ T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和B細(xì)胞。IFN gamma在觸發(fā)巨噬細(xì)胞對抗多種微生物靶標(biāo)方面發(fā)揮著重要作用,是一種與抗增殖、促凋亡和抗腫瘤機制相關(guān)的多效應(yīng)分子。由于這種效應(yīng)細(xì)胞因子被認(rèn)為是免疫的主要效應(yīng)因子,它已被用于治療多種疾病。
產(chǎn)品特點:
更簡單:無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法簡單高效,反應(yīng)僅需要幾分鐘。
更靈敏:無需抗體,檢測染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴散,即便是單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測。
更快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期僅需2.5小時。
更準(zhǔn)確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整。
更兼容:對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。
實驗步驟:
1.細(xì)胞培養(yǎng)
(以6孔板為參考,其他培養(yǎng)孔可根據(jù)實驗需要進行適當(dāng)調(diào)整。)每孔1x10^5-3x10^6細(xì)胞接種于6孔板中,培養(yǎng)至正常生長階段。
注:細(xì)胞接種量,可根據(jù)細(xì)胞大小、生長速度、以及實驗處理周期等調(diào)整。
2.細(xì)胞干預(yù)或者處理
(選做)可以根據(jù)實驗需要對細(xì)胞進行藥物或者其他刺激干預(yù)處理。
3.細(xì)胞共孵育培養(yǎng)
根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果,用細(xì)胞培養(yǎng)基按比例稀釋溶液,或者按比例在孔板培養(yǎng)液中加入適量的溶液與細(xì)胞共同孵育,同時設(shè)置不添加組作為陰性對照組。每孔加入配制的稀釋后的培養(yǎng)液共同孵育2h,去除舊培養(yǎng)液。